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The Lymphocyte Subsets
(1) 應(yīng)用CD3/CD19區(qū)分T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞
CD3是T細(xì)胞的特異性抗原，CD19則用來(lái)識(shí)別B細(xì)胞．因此應(yīng)用CD3/CD19雙標(biāo)試劑即可以區(qū)分和鑒定T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞亞群；CD3、CD19陽(yáng)性表達(dá)為獨(dú)立的陽(yáng)性細(xì)胞群體。如出現(xiàn)雙陽(yáng)性細(xì)胞均為假象。這樣就可不用同型對(duì)照來(lái)設(shè)定陰性或陽(yáng)性界線。此外，此檢測(cè)還會(huì)出現(xiàn)雙陰性群體，這些都是NK細(xì)胞，這些細(xì)胞也提供了雙陰性群體的對(duì)照。
(2) 應(yīng)用CD3/CD4來(lái)鑒定CD4+T細(xì)胞
首先用CD3來(lái)區(qū)分全部T細(xì)胞．而CD3/CD4雙陽(yáng)性細(xì)胞為真正的輔助/誘導(dǎo)性T細(xì)胞，這是HIV病毒感染的主要對(duì)象;CD3-/CD4+細(xì)胞群是由單核細(xì)胞組成，這些細(xì)胞相對(duì)于CD4+和T細(xì)胞來(lái)說(shuō)弱表達(dá)CD4，在光散射參數(shù)的位置分布也較廣。所以CD3/CD4抗體組合能夠完全把CD4陽(yáng)性輔助/誘導(dǎo)性T細(xì)胞區(qū)分開(kāi)。另外，應(yīng)用適當(dāng)?shù)碾p色組合如CD4與CD29,CD4與CD45RA,也可以測(cè)定T輔助細(xì)胞的的亞群。如CD4+2H4(CD 45RA)+細(xì)胞是Ts的誘導(dǎo)細(xì)胞;CD4+ 4B4 (CD29)+細(xì)胞Th的誘導(dǎo)細(xì)胞。同理,?利用CD8+CD45RA和CD8+CD29+ S6F1可測(cè)定T抑制細(xì)胞的亞群。T輔助細(xì)胞還可分成Th1、Th2兩個(gè)亞群，同時(shí)標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子IFN-γ和IL-4，可區(qū)分Th1細(xì)胞（CD4+/IFN-γ+）和Th2細(xì)胞（CD4+/IL-4+）。
（3）應(yīng)用CD3/CD8鑒定CD8+T淋巴細(xì)胞
CD8的表達(dá)不只限于細(xì)胞毒性T細(xì)胞，此抗原在部分的NK細(xì)胞上也能檢測(cè)到。所以利用CD3抗體才能把該細(xì)胞亞群分開(kāi)。
若采用三色測(cè)定可給出更為準(zhǔn)確的各亞群的情況:如真正的T輔助細(xì)胞應(yīng)是CD3+ CD4+CD8-,真正的T抑制細(xì)胞應(yīng)是CD3+CD4- CD8+,單標(biāo)CD8+細(xì)胞中不僅有T抑制細(xì)胞,還含有30%左右的NK細(xì)胞;而CD3+CD4-CD8-細(xì)胞群是γδT細(xì)胞,此類(lèi)細(xì)胞與感染有關(guān)．CD3+CD4+ CD8-細(xì)胞+CD3+CD4-CD8+細(xì)胞+CD3+CD4-CD8-細(xì)胞+CD3+CD4+CD8+細(xì)胞=CD3+細(xì)胞。
(4) 自然殺傷細(xì)胞（NK）的檢測(cè)
①CD16(FcRⅢ)表達(dá)于大多數(shù)NK細(xì)胞上，但也表達(dá)于中性粒細(xì)胞，此抗原NK細(xì)胞的表達(dá)比較弱，并在NK細(xì)胞活化時(shí)丟失；②CD56表達(dá)于大多數(shù)NK細(xì)胞上，也表達(dá)于一些T淋巴細(xì)胞，與CD3聯(lián)合使用可以區(qū)分CD3+/CD56+T淋巴細(xì)胞和CD3-/CD56+NK細(xì)胞。③聯(lián)合使用3種抗體最完全地鑒定所有的NK細(xì)胞。NK細(xì)胞或表達(dá)CD16，或表達(dá)CD56，但它們不表達(dá)CD3。CD16和CD56聯(lián)合使用，根據(jù)熒光強(qiáng)度可將NK細(xì)胞從雙陰性細(xì)胞中區(qū)分出來(lái)。這樣運(yùn)用該試劑組合，NK細(xì)胞可形成獨(dú)立的群體與其它細(xì)胞相區(qū)分。
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