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The Lymphocyte Subsets
機體免疫狀態是衡量機體是否患病的重要指標,目前多采用流式細胞術來監測機體的免疫狀態,其中最重要的指標是檢測T、B和NK淋巴細胞的水平。
T細胞主要包括T輔助細胞(Th)和T抑制細胞(Ts)細胞亞群。CD3+細胞代表外周血中總的成熟T細胞,理論上應約等于CD4+細胞和CD8+細胞的總和,但往往出現CD4+加CD8+細胞之和大于CD3+,這是因為CD4+細胞包括CD3+/CD4+細胞(真正Th細胞)和CD3-CD4+細胞(非Ts細胞),而后者包括CD3-CD8+CD16+56+細胞(一部分NK細胞)和CD3-CD8+CD16+56-(未知細胞)。由此可見,真正的TH細胞是CD3+CD4+細胞,真正Ts細胞是CD3+CD8+細胞。尤其當患者NK細胞明顯增加時,會使CD4細胞和CD8細胞的總和遠大于CD3+細胞,因此,用三色熒光標記才能分析真正的輔助性T細胞和抑制性T細胞。
首先在淋巴細胞中識別出CD3細胞,然后在CD3細胞中再區分CD4+和CD8+細胞。NK細胞的表面無T細胞和B細胞表面標志,但有CD16和CD56等標志,用CD16+56抗體能鑒定出NK細胞(一定是CD3陰性),CD3-CD16+56+細胞才是真正的NK細胞。根據是否表達CD8,又可將NK細胞分為CD3-CD8+CD16+56+細胞(所占比例小,不影響CD8比例)和CD3-CD8-CD16+56+細胞(主要成分)。
B細胞的表面標志是CD19,理論上CD3-CD19+細胞才是真正的B淋巴細胞。但CD3+CD19+細胞很少,可忽略不計,所以CD19+細胞就是B淋巴細胞。
在抗腫瘤效應中,CD4和CD8分別是T淋巴細胞的輔助/誘導細胞亞群與抑制/細胞毒細胞亞群,CD4細胞的主要功能是通過其分泌的淋巴因子,增強和擴大免疫應答過程,輔助誘導其它免疫細胞如殺傷性T細胞,B細胞等共同發揮抗腫瘤作用,CD4細胞的減少,導致免疫功能低下。CD4/CD8比值是重要的免疫狀態監測指標,其比例的降低與免疫系統損害的程度相關。
CD4降低見于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷癥、艾滋病、應用免疫抑制劑者;CD8降低見于自身免疫性疾病或變態反應性疾病;CD4/CD8比值升高見于惡性腫瘤、自身免疫性疾病、變態反應、病毒感染等;CD4/CD8比值降低見于艾滋病(常小于0.5)。監測器官移植排斥反應時,CD4/CD8比值升高預示可能發生排斥反應。
淋巴細胞擔負著免疫的主要功能。淋巴細胞亞群的測定有助于了解機體免疫狀況及一些疾病的監測。利用各種單克隆抗體與淋巴細胞表面的抗原結合,再配合多色熒光染料,通過流式細胞儀檢測分析即可以把各種不同功能的淋巴亞群區分開來,進而得到各亞群的相對比例。最常檢測的亞群包括T細胞(CD3)、B細胞(CD19)、NK細胞(CD16+56)、輔助性T細胞(CD3+CD4+)和抑制性T細胞(CD3+CD8+)等等。
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