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Clinical Application of T-SPOT.TB for Interferon-γ release assay in the immunodiagnosis of Tuberculosis
活動性結核與潛伏性結核感染的鑒別：機體免疫力低下時, 免疫系統與結核菌之間的平衡被打破,結核菌得以大量復制, 從而導致結核活動。結核菌數量增加時被加工呈遞的抗原也會增加, 因此被活化的抗原特異性效應T 細胞的數量也會隨之增加,在T-SPOT.TB中反映為斑點數目的增加。基于上述原理, SFCs的數量有可能存在一個界值用來鑒別活動性結核和潛伏性結核感染。
Janssens等研究了T-SPOT-TB 在鑒別潛伏結核和活動性結核中的作用, 他們將潛伏結核定義為T-SPOT-TB陽性的無癥狀結核接觸者。活動性結核患者在治療2周內進行T-SPOT-TB 測試, 減少了治療對檢測的影響。T-SPOT.TB結果在活動性結核患者中顯著高于潛伏性結核人群(P<0.0001)。受試者工作特征曲線分析顯示以4915 SFCs為分界值鑒別活動性與潛伏性結核感染, 其敏感性為83%, 特異性為74% , 但兩者間的交叉較大。Chee等對230例培養陽性活動性結核患者和183例結核接觸者進行了T-SPOT.TB 檢測, 在ESAT-6肽段庫中, 活動性結核患者與結核接觸者的SFCs數分別為108 vs140 SFCs /106PBMCs(P<0.001), 在CFP-10 肽段庫中, 分別為148 vs1 52 SFCs /106PBMC s (P<0.001),但兩者重疊區域較大。
潛伏性結核感染的斑點數有可能高于活動性結核, 因此T-SPOT.TB 難以區分活動性結核和潛伏性結核感染。其原因可能有兩點: (1) 潛伏性結核感染者的免疫功能良好, 少量的抗原刺激就激發出活躍的保護性免疫; (2) 活動性結核患者免疫功能低下, 大量的抗原刺激也不足以激起有效的細胞免疫。T-SPOT.TB的斑點數雖然并不精確地與結核活動程度呈正相關, 但仍然存在著結核活動程度越高斑點數越多的趨勢。
結核發病風險的預測 T-SPOT.TB 能否預測活動性結核對臨床意義重大, 尤其在我國這樣資源相對匱乏的高負擔國家。準確診斷潛伏性結核感染者并對其進行選擇性的預防性治療, 可以更加合理地運用資源以及減少患者的負擔和痛苦。Brodie等對56名涂陽肺結核密切接觸者與40名無接觸史者進行病例對照研究, 結果顯示T-SPOT.TB陽性與密切接觸具有更好的相關性, 比值比為219(P=0.03), 能更加準確地診斷潛伏性結核感染。Hesse-ling等對82名家庭密切接觸者的橫斷面研究也得出了相似的結論。Bakir等對908名與涂陽肺結核患者接觸過的兒童進行了為期3年的前瞻性研究,在381名T-SPOT.TB 結果為陽性的接觸者中, 最終11 名發展成為活動性結核, 其發生風險是T-SPOT.TB陰性接觸者的3186倍(P=0.024)。而且與TST 相比, 以T-SPOT.TB 為標準能夠更加準確地鎖定需要預防性抗結核治療的感染者。T-SPOT.TB的斑點數越多, 發生活動性結核的可能性越大, 而且短期內有過結核接觸史的患者T-SPOT.TB的斑點數較多時更有意義。此外, 對于T-SPOT.TB 陽性的人群, 定期的復查監測斑點數的變化是很有必要的。類似于TST, 如果T-SPOT.TB 的斑點數在短時間內顯著增加, 則強烈提示體內結核活動, 此時給予預防性的治療十分必要 。
綜上, T-SPOT.TB 在診斷結核感染方面具有良好的敏感性和特異性, 在鑒別活動性結核和潛伏性結核感染、預測結核發病風險方面也具有一定意義,已被越來越多的國家認可并應用于臨床診斷。基于結核抗原特異性T 細胞向病變部位集中的特點, T-SPOT.TB技術的檢測物已不僅局限于靜脈血, 支氣管肺泡灌洗液、痰液、胸腹水、腦脊液等也可用于對肺內及肺外結核的診斷。在現有結核診斷方法存在諸多缺陷的今天, T-SPOT.TB可以給臨床醫師提供有力參考, 指導臨床實踐。
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