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問:結核感染T細胞免疫斑點實驗的原理是什么?
從全血樣本中分離出外周血單個核細胞(PBMCs),與結核桿菌特異性抗原一起孵育,當外周血中存在針對結核桿菌的效應T淋巴細胞時,結核桿菌特異性抗原將刺激這些效應T淋巴細胞分泌IFN-γ。分泌的細胞因子被預包被在反應孔膜上的特異抗體捕獲,細胞和其它不必要的物質通過洗滌被去除。加入生物素標記的檢測抗體與被捕獲的IFN-γ結合,辣根過氧化物酶通過親和素與生物素特異性結合,顯色底物溶液在反應部位被酶分解并最終形成斑點。每一個斑點代表一個分泌IFN-γ的效應T淋巴細胞。通過對斑點進行計數可以判斷體內是否存在對結核桿菌反應的效應 T細胞,從而對結核病進行輔助診斷。 -
問:試劑盒所使用的抗原與其他同類產品有什么區別?
產品包含了CFP-10,ESAT-6及Rv3615c肽庫三種不同類型的抗原,使用時三種抗原與標本中的單個核細胞(PMBC)加入同一個測試孔中,這項技術也獲得了國家發明專利授權(專利號ZL 2012 I 0090659.1),是目前國內外獨有的檢測抗原組合體系。 -
問:QB-T結核分枝桿菌效應T細胞檢測試劑盒都需要哪一些儀器或試劑?
淋巴細胞分離液;RPMI 1640培養基;II級生物安全柜;水平離心機(降速可調);自動血細胞分析儀(可替換為顯微鏡); 37℃, 5% CO2培養箱;酶聯斑點分析儀(可替換為顯微鏡或放大鏡)。